Диссоциация ES-клеток Аккутазой

Аккутаза - раствор протеолитических и коллагенолитических ферментов. Используется для обычного отделения клеток от стандартной пластиковой посуды для тканевых культур и пластиковой посуды с адгезионным покрытием. Фермент достаточно мягкий и хорошо подходит нежным ES-клеткам.

Необходимые реактивы

  • Аккутаза. Разогреть на столе до комнатной температуры. Не нагревать до 37С, поскольку Аккутаза потеряет активность
  • PBS

Протокол диссоциации клеток Аккутазой

  1. Отмыть чашку с клетками от остатков среды стерильным PBS
  2. Добавить в чашку Аккутазу из расчета 10 мл на 75 см^2^
  3. Перенести чашку в инкубатор на 3-10 минут до тех пор, пока клетки не открепятся от поверхности
  4. Перенести клетки в емкость для центрифугирования. Никаких дополнительных отмывок или инактиваторов не нужно
  5. Клетки готовы к дальнейшим манипуляциям.

Дополнительная литература

Описание от StemCells