Буфер N

Буфер N применяется для нейтрализации раствора с лизированными бактериями c последующей очисткой плазмидной ДНК на колонках с силикой.

Необходимые компоненты

  • Изотиоционат гуанидина или гуанидин гидрохлорид

  • Ацетат калия (potassium acetate)

  • Ледяная уксусная кислота

  • mQ

  • pH-метр

Буфер N

Содержание 50 мл 100 мл 150 мл 200 мл 250 мл 1 л

GuSCN (Mw 118.16) или


GuHCl (Mw 95.53)

3.31 М


4.09 М

22.5 г


22.5 г

45 г


45 г

67.5 г


67.5 г

90 г


90 г

112.5 г


112.5 г

450 г


450 г

KOAc (Mw 98.15) 0.759 М 3.77 г 7.45 г 11.18 г 14.9 г 18.63 г 74.5 г
  • Добавить mQ до 80% объема от запланированного
  • С помощью ледяной уксусной кислоты титровать pH до значения 4.3 (на один литр буфера N требуется более 100 мл уксусной кислоты)
  • Довести объем до запланированного добавлением mQ

Со временем в буфере N выпадает осадок гуанидина. Как показывает опыт, это не влияет на качество очистки плазмиды.