EGTA
0.5М EGTA
ЭГТА (этиленгликольтетрауксусная кислота, EGTA) - хелатирующий агент с более высоким сродством к кальцию, чем к магнию. Используется при приготовлении хроматина/белковых лизатов для защиты от ДНКаз/протеаз.
Для приготовления стоковых растворов используют порошкообразный EGTA (C14H20N2O10, Mw= 380.4). Вещество достаточно дорогое и используется редко, так что стоковые растворы нужно готовить в минимальном объеме. В воде растворяется плохо, только до концентрации 2мМ (pH 2.7), но с увеличением pH растворимость увеличивается. В качестве стока готовят 0.5М раствор. Нужное количество EGTA растворяется при pH 5-6.
- Для приготовления желаемого объема 0.5М ЭГТА необходимо навесить:
| 25 мл | 30 мл | 35 мл | 40 мл | 50 мл | 100 мл | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| EGTA | 4.75 г | 5.7 г | 6.66 г | 7.60 г | 9.51 г | 19.02 г |
- Добавить mQ, довести объем до 80% от запланированного
- Довести pH до нужного (обычно pH=8.0) добавлением NaOH
- Довести до запланированного объема
- Стерилизовать через 0.22 мкм фильтр
- Хранить при 4С.