0.5М раствор фосфата натрия (pH 8.5) используется для приготовления буфера W.
Фосфатные буферы — буферные растворы, широко используемые в биохимии и молекулярной биологии. Для приготовления фосфатных буферов используют гидрофосфаты калия или натрия и дигидрофосфаты калия или натрия, соответственно.Так как фосфорная кислота имеет несколько констант диссоциации, возможно приготовление буферных растворов со значениями рН от 6 до 8, наиболее распространенным является фосфатный буфер с рН около 7.
Для приготовления фосфатного буфера с нужным pH можно использовать несколько подходов:
Получить раствор одно, двух или трехносновного фосфата натрия и довести до нужного pH
Смешать определенные количества растворов одно- и двухосновного фосфата натрия для получения нужного pH
Подробнее об этом можно почитать на OpenWetWare (здесь и здесь), wikipedia (здесь) или Sigma (здесь)
Способ 1
Способ 2
Навесить NaH2PO4 для приготовления выбранного объема 0.5 М раствора
Добавить mQ до 80% от выбранного объема
Добавлять NaOH до тех пор, пока pH не достигнет 8.5
Довести объем до выбранного добавлением mQ
Стерилизовать раствор 0.22 мкм фильтром или автоклавированием
| 10 мл, г | 20 мл, г | 40 мл, г | 50 мл, г | 100 мл, г | 200 мл, г | |
|---|---|---|---|---|---|---|
Na2HPO4 (Mw 141.96) или Na2HPO4• 2H2O (Fw 177.99) или Na2HPO4• 4H2O (Fw 209.07) или Na2HPO4• 7H2O (Fw 268.07) |
0.71 0.89 1.04 1.34 |
1.42 1.78 2.09 2.68 |
2.84 3.56 4.18 5.36 |
3.55 4.45 5.23 6.70 |
7.1 8.9 10.5 13.4 |
14.2 17.8 20.9 26.8 |
| 20 мл, г | 40 мл, г | 50 мл, г | 100 мл, г | 200 мл, г | |
|---|---|---|---|---|---|
NaH2PO4 (Mw 119.98) или NaH2PO4• H2O (Fw 137.99) или NaH2PO4• 2H2O (Fw 156.01) |
1.2 1.38 1.56 |
2.4 2.76 3.12 |
3.0 3.45 3.90 |
6.0 6.90 7.80 |
12.0 13.80 15.60 |