Буфер M применяется для элюции ДНК из агарозного геля на колонках с силикой.
Изотиоционат гуанидина GuSCN
Краситель Крезоловый красный
mQ
1М Трис-HCl pH 7.4
0,5M EDTA, pH 8.0
3M NaOAc, pH 5.0
Содержание | 50 мл | 100 мл | 150 мл | 200 мл | 250 мл | 1 л | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
GuSCN (Mw 118.16) | 45% | 22.5 г | 45 г | 67.5 г | 90 г | 112.5 г | 450 г |
1M Tris-HCl (pH 7.4) | 50 мМ | 2.5 мл | 5 мл | 7.5 мл | 10 мл | 12.5 мл | 50 мл |
0.5М ЭДТА (pH 8.0) | 10 мМ | 1 мл | 2 мл | 3 мл | 4 мл | 5 мл | 20 мл |
Добавить mQ до 80% объема от запланированного
Растворить гуанидин
Добавить крезоловый красный на кончике лезвия, пока цвет не станет насыщенным
Если цвет раствора красный, то добавлять по каплям 3M NaOAc, пока раствор не преобретет оранжево-желтый оттенок.
Довести объем до запланированного добавлением mQ
Окраска готового раствора должна быть как на фотографии ниже.