Буфер Y

Буфер Y применяется для очистки ДНК из реакционных смесей на колонках с силикой.

Необходимые компоненты

  • Гидрохлорид гуанидина GuHCl

  • Изопропанол

  • Краситель Крезоловый красный

  • mQ

  • 1М Трис-HCl pH 7.4

  • 0,5M EDTA, pH 8.0

  • 3M NaOAc, pH 5.0

Буфер M

Содержание 50 мл 100 мл 150 мл 200 мл 250 мл 1 л
GuHCl (Mw 95.53) 30% 15 г 30 г 45 г 60 г 75 г 300 г
Изопропанол 40% 20 мл 40 мл 60 мл 80 мл 100 мл 400 мл
1M Tris-HCl (pH 7.4) 50 мМ 2.5 мл 5 мл 7.5 мл 10 мл 12.5 мл 50 мл
0.5М ЭДТА (pH 8.0) 10 мМ 1 мл 2 мл 3 мл 4 мл 5 мл 20 мл
3M NaOAc, pH 5.0 15 мМ 2.5 мл 5 мл 7.5 мл 10 мл 12.5 мл 50 мл

  • Добавить mQ до 80% объема от запланированного

  • Растворить гуанидин

  • Довести объем до запланированного добавлением mQ

  • Добавить крезоловый красный на кончике лезвия, пока цвет не станет более-менее насыщенным

Окраска готового раствора должна быть как на фотографии ниже.