TE

ТЕ буфер (Трис-ЭДТА) используется для хранения ДНК и РНК, а также для приготовления реакционных буферов. EDTA в TE хелатирует катионы магния, кальция и других двухвалентных металлов, необходимых для большинства ферментов деградации ДНК и РНК. Для хранения ДНК используют Tris с pH 8, для РНК pH 7,5. Слабощелочной pH, поддерживаемый Трис, защищает ДНК от апуринизации и последующей бета-элиминации. Для стабильности РНК необходим более нейтральный pH.

10xTE

Cостав 100 mM Tris-HCl (pH 7.5-8.5), 10 mM EDTA (pH 8.0). Для элюции ДНК советуют использовать ТE с pH8.0

  • Смешать стоковые растворы
1 мл 2 мл 5 мл 10 мл 20 мл 50 мл
1M Tris-HCl (pH по выбору) 100 мкл 200 мкл 500 мкл 1 мл 2 мл 5 мл
0.5М ЭДТА(pH 8.0) 20 мкл 40 мкл 100 мкл 200 мкл 400 мкл 1 мл
mQ 880 мкл 1760 мкл 4400 мкл 8.8 мл 17.6 мл 44 мл

  • Стерилизовать автоклавированием

  • Хранить при КТ

1xTE

Cостав 10 mM Tris-HCl (pH 7.5-8.5), 1 mM EDTA (pH 8.0). Для элюции ДНК советуют использовать ТE с pH8.0

  • Смешать стоковые растворы
1 мл 2 мл 5 мл 10 мл 20 мл 50 мл
1M Tris-HCl (pH по выбору) 10 мкл 20 мкл 50 мкл 100 мкл 200 мкл 500 мкл
0.5М ЭДТА(pH 8.0) 2 мкл 4 мкл 10 мкл 20 мкл 40 мкл 100 мкл
mQ 988 мкл 1976 мкл 4960 мкл 9.88 мл 19.76 мл 49.4 мл

  • Стерилизовать автоклавированием или фильтрацией через 0.22 мкм фильтр

  • Хранить при КТ

ЭДТА связывает ионы магния в соотношении 1:1. Поскольку магний требуется для протекания ферментативных реакций, нужно учитывать присутствие 1 мМ ЭДТА в образце ДНК при постановке ПЦР и других реакций.

Чтобы избежать ингибирования ЭДТА, в некоторых протоколых используется 0.1-кратный ТЕ, или ТЕ с 0.1мМ ЭДТА.

рецепт TE на OpenWetWare